超氧化物歧化酶的抗炎作用研究


国内外研究表明,各种不同来源的超氧化物歧化酶(SOD)对非特异性炎症有较强的抗炎作用,对类风湿性关节炎有较好的疗效。我们用几种不同炎症动物模型对猪血来源的SOD进行了研究,现报道如下。

1、材料

动物:Wistar大白鼠,雄性,由本校实验动物中心提供。药品:猪血来源的超氧化物歧化酶冻干粉剂,由四川四达生物工程产业开发股份有限公司提供。批号:930805,比活性为7000u/mg蛋白,临用时用注射用生理盐水溶解。

2、方法与结果

(1)SOD对角叉菜胶致炎的影响

取Wistar雄性大鼠45只,体重138.2±10.5g,随机均分为5组:阴性对照组、阳性对照组和3个给药组。给药前用毛细管放大测量法测每只大鼠足跖容积正常值,然后按下述方法给药:阴性对照组腹腔注射生理盐水(NS)1ml/200g;阳性对照组腹腔注射氢化可的松1ml/200g(10mg/kg),而3个给药组分别腹腔注射超氧化物歧化酶生理盐水溶液1ml/200g(25、50、100mg/kg)。半小时后,将1%角叉菜胶溶液0.1ml于大鼠足掌腱膜皮下注射致炎。测定致炎后1、2、3、4、5、6小时各组大鼠足跖容积,计算肿胀百分率。结果见表1。  

将各给药组与阴性对照组同一时间肿胀率进行比较。结果显示:SOD各剂量组的足跖肿胀率均显著小于阴性对照组,且抗炎作用强度有明显剂量依赖性。

表1 SOD腹腔注射对大鼠角叉菜胶足跖肿胀的影响

表2 SOD腹腔注射对大鼠巴豆油肉芽肿的影响

SOD对大鼠巴豆油气囊肿的影响取Wistar雄性大鼠40只,体重180±21g,随机分为5组:阴性对照组、阳性对照组和3个给药组。用乙醚将各组大鼠浅麻醉后,于大鼠背部皮下注射氮气20ml,随即向气囊内注入1%巴豆油1ml,24小时后抽去囊内氮气。从致炎当日开始各组分别给药(见表2),每天1次,连续7天。末次给药后24小时处死动物。测每鼠囊内渗出液体积,并剥离囊壁肉芽肿组织,80℃温箱烤干,称重,并换算为100g体重囊壁的毫克数,结果见表2。

各给药组与阴性对照组比较,结果表明:SOD各组(25、50和100mg/kg组)均能显著抑制巴豆油所致炎性渗出和肉芽肿形成。

(3)SOD对大鼠蛋清性关节炎的影响

取Wistar雄性大鼠45只,体重156.8±7.8g,随机分为5组:阴性对照组、阳性对照组和3个给药组。给药前用毛细管放大测量法测各大鼠足跖容积正常值。然后给药。阴性对照组腹腔注射生理盐水1ml/200g,阳性对照组腹腔注射氢化可的松1ml/200g(10mg/kg),3个给药组分别腹腔注射超氧化物歧化酶(25、50、100mg/kg)生理盐水溶液1ml/200g。半小时后,用新鲜鸡蛋清(10%0.1ml)于各大鼠足掌腱膜皮下注射致炎。分别测致炎后5、30分钟,1、2、4及6小时各组大鼠足跖容积,计算肿胀百分率。结果见表3。

表3 SOD腹腔注射对大鼠蛋清性足跖肿胀的影响

将各给药组与阴性对照组同一时间肿胀率进行比较,结果表明:SOD各组均有一定抗炎作用,以30分钟最为明显。低剂量组(25mg/kg)抗炎持续时间短,中剂量组(50mg/kg)抗炎作用可持续4小时,而大剂量组(100mg/kg)的抗炎作用时间与氢化可的松组相似,均可持续6小时,具有明显的量效关系。

(4)SOD对佐剂性关节炎的影响

取Wistar雄性大鼠50只,体重145.6±6.5g,随机分为5组。于给药前24小时于各大鼠右后足跖皮内注射完全免疫佐剂0.1ml致炎,然后分别每日腹腔注射给药1次,连续15天。用千分卡尺测定致炎后18小时及5、10和15天的足跖和踝关节肿胀程度。计算肿胀百分率。结果见表4和表5。

表4 SOD腹腔注射对大鼠佐剂性足跖肿胀的影响

表5 SOD腹腔注射对大鼠佐剂性踝关节肿胀的影响

将各给药组与阴性对照组同一时间肿胀率进行比较,结果表明:SOD对大鼠佐剂性足跖肿胀有明显抑制作用,在实验剂量范围内且有明显剂量依赖性。实验过程中发现致炎10天,对侧足跖及双前肢开始肿胀、背部脱毛,以阴性对照组为明显,各给药组和阳性对照组反应较轻。另外,SOD对佐剂后期关节损伤有明显抑制作用。其中大剂量组(100mg/kg)对急性期也有明显作用。

3、讨论

目前,SOD作为一种药用酶,业已受到广泛重视,我们在建立大鼠非特异性急性、慢性及免疫性炎症等动物炎症模型的基础上,对猪血来源的SOD注射剂的抗炎作用进行了研究,结果显示猪血来源的SOD亦有明显的抗炎作用。其抗炎机理可能与SOD清除自由基,稳定细胞膜和溶酶体膜有关。本实验结果为猪血来源的SOD进一步临床试验提供了药理学基础。